SVEA C4液相色谱柱主要是由柱管、压帽、卡套、筛板、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20µm(5~10µm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
SVEA C4液相色谱柱的分类及应用范围:
分类方法很多,可按键合相类型、用途、基质种类等进行分类。
1、硅胶基质柱(4大类)
目前,分析型SVEA C4液相色谱柱多为硅胶基质柱,细分为:
a、高纯硅胶柱:以高纯度硅烷化硅胶(Silica)为填料,应用范围较广,但只能在PH2.0-7.5,小于60度的条件下使用。又由于强极性硅羟基(Si-OH)的次级保留效应较强,所以应用受到局限,已被键合相柱所取代。
b、反相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质,表面键合弱极性官能团的固定相。目前多用C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5等。用于分离大多数有机化合物,应用范围*。
c、正相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质,表面键合极性官能团的固定相。目前较多的为:NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL。多用于分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。
d、离子交换柱:是以硅烷化硅胶为基质,以磺化交联键合强阳/阴离子基团的固定相,又分为强酸性、强碱性、弱酸性、弱碱性等不同规格。用于分离解离性较强的有机盐类化合物。
2、聚合物基质柱:
聚合物基质柱是指采用聚苯乙烯—二乙烯基苯、聚甲基丙烯酸脂、多孔性微球蛋白等聚合物凝胶作为主要填料的一类色谱柱。其相对于硅胶柱具有更强的疏水性及更宽泛的pH范围(1.0~14.0),但柱效较低,目前主要应用于凝胶渗透色谱、凝胶过滤色谱及分子排阻色谱。主要用于分离蛋白质类等大分子化合物。